Formedium植物媒介促進(jìn)大腸桿菌培養(yǎng)

Formedium在其培養(yǎng)基中添加了六種植物培養(yǎng)基，用于培養(yǎng)大腸桿菌。在所有六種植物培養(yǎng)基中，對(duì)于以下LB Miller培養(yǎng)基，LB Lennox培養(yǎng)基和2YT培養(yǎng)基的配方，胰蛋白胨已被大豆蛋白胨替代。胰蛋白胨和酵母提取物作為生長和蛋白質(zhì)表達(dá)的一般氮源存在。兩者都是氮的*來源，另外酵母提取物提供B型維生素，碳水化合物和生長因子。

在植物培養(yǎng)基中，因此避免了用動(dòng)物來源的成分污染培養(yǎng)基，用大豆蛋白胨代替胰蛋白胨。與作為牛奶酪蛋白的胰腺消化物的胰蛋白胨相反，其替代大豆蛋白胨通過大豆粉的Papaic水解制備。與胰蛋白胨相比，大豆蛋白胨的氮含量（9.5％）略低，其氨基氮含量（3％）相同。這種差異小于2％，并且不會(huì)顯著影響生長和蛋白質(zhì)表達(dá)。

使用胰蛋白胨作為氮源和大豆蛋白胨作為替代來源的比較研究顯示生長沒有差異。

在液體培養(yǎng)基中，通過680nm處的光密度測量大腸桿菌的細(xì)胞生長，這在LB Miller Broth，LB Lennox Broth和含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的2YT肉湯培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞的生長曲線之間未顯示任何顯著差異。
在LB Lennox Agar的菌落形成單位（CFU）的固體培養(yǎng)基計(jì)數(shù)中，含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的LB Miller瓊脂和2YT瓊脂彼此沒有顯著差異。

含有大豆蛋白胨和胰蛋白胨的培養(yǎng)基之間沒有顯著差異。與在液體和固體培養(yǎng)基中使用胰蛋白胨相比，大豆蛋白胨也表現(xiàn)良好。

在所有三種培養(yǎng)基LB Miller Vegetal培養(yǎng)基，LB Lennox Vegetal培養(yǎng)基和包含大豆蛋白胨的2YT植物培養(yǎng)基中，不存在動(dòng)物來源的成分。由于沒有動(dòng)物源組件Formedium證明;

• 在本產(chǎn)品的制造過程中，不使用源自動(dòng)物或來自動(dòng)物的原料。
• 生產(chǎn)中使用的材料符合經(jīng)指令1999/82 / EC修訂的歐洲指令75/318 / EEC。

因此，F(xiàn)ormedium Ltd.認(rèn)為該產(chǎn)品在牛海綿狀腦?。˙SE）或傳染性海綿狀腦病（TSE）方面沒有任何風(fēng)險(xiǎn)。

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方法：
肉湯培養(yǎng)：在LB Lennox，LB Miller和2YT培養(yǎng)基中測量細(xì)胞生長。
每種培養(yǎng)基存在于含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的制劑中。

• 將單菌落在5ml所有三種培養(yǎng)基中孵育（3胰蛋白胨對(duì)3大豆蛋白胨）O / N在37℃，180rpm。
• 在第1天：100稀釋后，在150ml燒瓶中培養(yǎng)30ml，溫度為37℃，180rpm。通過每小時(shí)測量的680nm的光密度測量生長
• 3生物重復(fù)
• LB Lennox（g / l）; 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10，酵母提取物5，NaCl 5. 
  LB Miller（g / l）; 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10，酵母提取物5，NaCl 10. 
  2YT; （克/升）; 大豆蛋白胨16或胰蛋白胨16，酵母提取物10，NaCl 5。

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方法：
平板上的瓊脂培養(yǎng)：在LB Lennox，LB Miller和2YT瓊脂平板上測量菌落形成單位的數(shù)量。
每種培養(yǎng)基存在于含有胰蛋白胨或大豆蛋白胨的制劑中。

• 將單菌落在5ml所有三種培養(yǎng)基中孵育（3胰蛋白胨對(duì)3大豆蛋白胨）O / N在37℃，180rpm。
• 第100天，將100μl10倍稀釋系列（至10-6）涂布在與瓊脂相同的培養(yǎng)基上（例如，Miller肉湯菌落到Miller瓊脂上，Lennox-Soya菌落到Lennox-Soya瓊脂上）。在37°C下孵育O / N.
• 3個(gè)生物重復(fù)的菌落計(jì)數(shù)（cfu / ml）
• LB Lennox（g / l）; 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10，酵母提取物5，NaCl 5，瓊脂15. 
  LB Miller（g / l）; 大豆蛋白胨10或胰蛋白胨10，酵母提取物5，NaCl 10，瓊脂
  15。2YT; （克/升）; 大豆蛋白胨16或胰蛋白胨16，酵母提取物10，NaCl 5，瓊脂15。

VLB-Broth Lennox

將20克粉末介質(zhì)懸浮在1升蒸餾水中，在室溫下干燥。