matrixome層粘連蛋白511E8片段說(shuō)明書(shū)

Laminin-511 是基底膜的主要成分，可作為多能干細(xì)胞（ES/iPS 細(xì)胞）的支架。
作為基底膜的一部分，層粘連蛋白 511 (800 kDa) 與細(xì)胞表面的整合素結(jié)合。
Laminin-511 是一種非常大的蛋白質(zhì) (800 kDa)，由三條鏈（α-、β-和 γ- 鏈）組成，并形成超分子聚集體。很難作為重組蛋白生產(chǎn)。
當(dāng)我們將 Laminin-511 片段化并在細(xì)胞表面尋找與整合素結(jié)合的最小成分時(shí)，我們確定了稱(chēng)為 Laminin-511 E8 片段 (150 kDa) 的成分。我們決定將該成分作為重組蛋白生產(chǎn)。
　

與“Laminin-511 (Intact)"相比，人類(lèi) iPS 細(xì)胞對(duì) Laminin-511E8 片段的粘附更強(qiáng)。

與“Laminin-511 (Intact)"相比，人類(lèi) iPS 細(xì)胞對(duì) Laminin-511 E8 片段的粘附更強(qiáng)。
比較了層粘連蛋白 511 E8 片段和其他底物的細(xì)胞附著。
吸光度 (OD570) 表示相對(duì)于對(duì) Matrigel 的最大影響值進(jìn)行歸一化的附著細(xì)胞的相對(duì)數(shù)量，該值被任意設(shè)置為 1。
該結(jié)果證實(shí)層粘連蛋白-511 E8 片段強(qiáng)烈地粘附于細(xì)胞。

單個(gè)人類(lèi) ES 細(xì)胞迅速附著在 Laminin-511E8 片段上并增殖。

分散的人單個(gè) ES 細(xì)胞迅速粘附在 Laminin-511 E8 片段上并立即增殖。
我們?cè)趯诱尺B蛋白 511 E8 片段和其他細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)上傳代人 ES 細(xì)胞。
傳代時(shí)單個(gè)人 ES 細(xì)胞集落證實(shí) Laminin-511 E8 片段迅速粘附在細(xì)胞上并增殖。

在 ES/iPS 細(xì)胞培養(yǎng)中使用 Laminin-511E8 片段的更多優(yōu)勢(shì)

使用傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法，如果 ES/iPS 細(xì)胞分散成單個(gè)細(xì)胞，細(xì)胞就會(huì)死亡。
因此，在傳代時(shí)，一定程度上需要維持一個(gè)細(xì)胞集落。

使用 Laminin-511 E8 片段作為細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)，甚至可以維持和培養(yǎng)單個(gè) ES/iPS。
-> 減少學(xué)習(xí)細(xì)胞培養(yǎng)方法所需的時(shí)間。
-> 細(xì)胞培養(yǎng)的延伸效率顯著提高。

使用 Laminin-511E8 片段生長(zhǎng) ES/iPS 細(xì)胞

*5天
*菌落傳代方法

傳統(tǒng)的培養(yǎng)方法（菌落傳代）傳代時(shí)的延伸效率為1:4，而使用Laminin-511 E8片段作為細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)時(shí)，延伸率為1:100。

使用 Laminin-511E8 片段批量生產(chǎn) ES/iPS 細(xì)胞培養(yǎng)物

我們比較了傳統(tǒng)方法（菌落法）培養(yǎng)30天的ES/iPS細(xì)胞數(shù)量和使用Laminin-511 E8片段作為細(xì)胞培養(yǎng)基質(zhì)培養(yǎng)的ES/iPS細(xì)胞數(shù)量。圖表的橫軸表示培養(yǎng)天數(shù)，縱軸表示細(xì)胞數(shù)。
結(jié)果證實(shí)，與傳統(tǒng)方法（菌落法）相比，使用Laminin-511 E8片段的細(xì)胞數(shù)增加了200或更多。