viagenbiotech 302-C 現(xiàn)貨——上海起發(fā)

DirectPCR Lysis Reagent (Cell) 細(xì)胞直接PCR裂解液

[單瓶試劑，細(xì)胞裂解+ PCR-步到位]

產(chǎn)品關(guān)鍵詞:

Viagen Biotech; DirectPCRB直接PCR; PCR genotyping基因分型; Proteinase K蛋白酶K; 302-C (301-C);

產(chǎn)品介紹:

Viagen DirectPCRB DNA Extraction System (DirectPCR8 DNA提取系統(tǒng))是一種單管系統(tǒng),盱從小鼠尾巴，職,卵黃囊和培養(yǎng)細(xì)胞內(nèi)快遞制備DNA。Viagen Biotech, Inc科學(xué)家開發(fā)的組分允許用DirectPCR@ DNA Extraction System獲得的DNA提取物與基因分型用的基因組PCR兼容。生物樣本的粗提物與許多分子生物學(xué)級(jí)的試劑此如PCR都難以兼容,部分原因在于粗提物內(nèi)含有抑制劑。DirectPCR⑧不僅介導(dǎo)生物樣品的快速裂解，而且含有抑制劑,能夠有效抑制PCR擴(kuò)增用粗提裂解物中存在的抑制效應(yīng)，同時(shí)大程度保持釋放出來的基因組DNA的完整性。申請(qǐng)中的DirectPCR@操作起來,消除任何溶液轉(zhuǎn)移或開管步驟，根本上節(jié)省了大量時(shí)間和精力。

產(chǎn)品特點(diǎn):

1)省時(shí):少的動(dòng)手時(shí)間;巴裂解液粗提物即可用于PCR;

2)省錢:僅需成本的反應(yīng)流程;

3)安全:無有機(jī)試劑;

4)環(huán)保:少消耗(有機(jī)試劑，子,槍頭等等)

5)可靠有效: 成功率保證高產(chǎn)量

簡(jiǎn)單流程:

1)用DirectPCR⑧裂解細(xì)胞;

2) 85°C孵育45min;

3)取1μ裂解液進(jìn)行PCR基因型研究。

詳細(xì)流程:

1 ) 10cm細(xì)胞培養(yǎng)板細(xì)胞，使用添加新鮮制備的0.2-0.4mg/ml蛋白酶K的200-300ul DirectPCR@Lysis Reagent (CelI)細(xì)胞裂解液重懸細(xì)胞。蛋白酶K在DirectPCR@中穩(wěn)定保存~24h。如果處理少量細(xì)胞，會(huì)很難稱量蛋白酶K的粉末，可直接使用Viagen提供的基因組PCR級(jí)的蛋白酶K溶液(Cat#501-PK) ， 使用濃度為0.5- 1.0mg/ml(每1ml DirectPCR@中加入25- 50μl蛋白酶K溶液)。[注意] : 若使用小量細(xì)胞，可用去離子水稀釋DirectPCR⑧高達(dá) 10倍,然后使用合適更多體積的裂解液用于PCR。見表1, DirectPCR@Lysis Reagent (C ell)起始使用條件。

2)置于旋轉(zhuǎn)雜交爐中, 55°C轉(zhuǎn)動(dòng)管子處理5- 6h或直到看不見組織團(tuán)。若有必要,能過夜裂解樣本,不會(huì)影響效率。裂解至關(guān)重要。要想獲得更具有重復(fù)性的結(jié)果，中途搖動(dòng)一下瓶子以更換管子的位置一次， 最好在處理2-3h之后。

3)水浴鍋內(nèi)85°C孵育粗提液45min.[可選]于步驟4)前離心10s沉淀毛發(fā)。粗提液可置于-20°C保存1年(或4°C保存1周)，不會(huì)降低效率。

4)每50ul PCR反應(yīng)體系加入0.5- 1.0ul裂解液。推薦PCR用Qiage Hotstar Taq DNA polymerase或Sigma JumpStart Taq DNA polymerase.